متلازمة الإسهال الحاد الخنازير فيروس كورونا (SADS-CoV) هو فيروس كورونا الخنازير الممرض المعوي المكتشف حديثًا والذي يمكن أن يسبب الإسهال المائي في الخنازير حديثي الولادة ويسبب خسائر اقتصادية كبيرة لصناعة الخنازير.في الوقت الحالي ، لا توجد طريقة مصلية مناسبة لتقييم فعالية اللقاح ولعدوى SADS-CoV ، لذلك هناك حاجة ملحة لاستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) لتعويض هذا النقص.هنا ، تم إنشاء بلازميد مؤتلف يعبر عن بروتين SADS-CoV spike (S) المدمج مع مجال IgG Fc البشري لإنتاج الفيروس البكتيري المؤتلف ويعبر عنه في خلايا HEK 293F.يتم تنقية بروتين S-Fc باستخدام راتينج البروتين G ويحتفظ بالتفاعل مع Fc المضاد للإنسان والأجسام المضادة لـ SADS-CoV.ثم تم استخدام بروتين S-Fc لتطوير ELISA غير المباشر (S-iELISA) وتحسين ظروف تفاعل S-iELISA.نتيجة لذلك ، من خلال تحليل قيمة OD450 نانومتر لـ 40 مصلًا سلبيًا من SADS-CoV أكده اختبار التألق المناعي (IFA) والنشاف الغربي ، تم تحديد قيمة القطع لتكون 0.3711.كان معامل الاختلاف (CV) في الأمصال الإيجابية لـ 6 SADS-CoV داخل وبين دورات S-iELISA كلها أقل من 10 ٪.أظهر اختبار التفاعل المتبادل أن S-iELISA ليس له تفاعل تفاعلي مع مصل فيروسات الخنازير الأخرى.بالإضافة إلى ذلك ، بناءً على اكتشاف 111 عينة مصل سريري ، كان معدل المصادفة الإجمالي لـ IFA و S-iELISA 97.3 ٪.أظهر اختبار تحييد الفيروس مع 7 قيم مختلفة من OD450nm من المصل أن قيمة OD450nm المكتشفة بواسطة S-iELISA كانت مرتبطة بشكل إيجابي باختبار تحييد الفيروس.أخيرًا ، تم إجراء S-iELISA على 300 عينة من مصل مزرعة الخنازير.أظهرت المجموعات التجارية لفيروسات معوية الخنازير الأخرى أن المعدلات الإيجابية لـ IgG لـ SADS-CoV و TGEV و PDCoV و PEDV كانت 81.7٪ و 54٪ و 65.3٪ على التوالي.6٪ على التوالي.تظهر النتائج أن S-iELISA محدد وحساس وقابل للتكرار ، ويمكن استخدامه للكشف عن عدوى SADS-CoV في صناعة الخنازير.هذه المادة محمية بموجب حقوق النشر.كل الحقوق محفوظة.
الوقت ما بعد: 22 يونيو - 2021